基因编辑技术


为了使我们的客户获得理想的动物模型,符合他们从基础科研到药物研发的研究需求,91短视频版在线观看视频始终专注于模式生物的基因编辑与模型研发,拥有专业的项目设计团队与人工智能自动化分析系统SmartEddi,以及经验丰富、受过严格专业培训的实验技术队伍,自2000年以来建立了稳定而高效的基因工程动物研发服务平台,致力于提供最高标准的基因修饰动物模型解决方案。



我们使用以下三种基因修饰技术构建基因工程动物模型:

三种基因修饰技术的比较

核心技术类型
技术要点 周期 技术应用 优缺点
CRISPR/Cas9技术 Cas9 核酸酶剪切特定靶点 6–9 个月 基因敲除、条件性基因敲除、基因定点插入、点突变、基因人源化 技术周期短、效率高;有潜在脱靶风险,但风险可控(选择合适的sgRNA ? 可有效降低脱靶风险;通过测序可确定是否脱靶;传代可去除脱靶位点)
ESC 打靶 同源重组对靶基因进行修饰 9–12 个月 基因敲除、条件性基因敲除、基因定点插入、点突变、基因人源化 技术成熟、效果稳定、无脱靶,可实现大片段重组;实验周期较长

Piggybac转基因技术

转座酶将片段整合到基因组 3–6 个月 基因过表达 单拷贝插入,表达阳性率高;多位点插入,后续实验需建系



关于三种基因修饰技术的详细介绍,请见下文,以91短视频在线观 为例。



ES细胞打靶

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在91短视频在线观 ES细胞中,利用同源重组原理(也就是核苷酸序列在两个相似或相同的DNA分子之间交换的基因重组),获得带有研究者预先设计的遗传修饰的中靶ES细胞。经过遗传修饰的ES细胞仍然保持分化的全能性,可以发育为嵌合体动物的生殖细胞,使得经过修饰的遗传信息经生殖系遗传,最终获得基因修饰91短视频在线观 模型。发展至今,仍是最为经典、可靠的91短视频在线观 基因修饰或编辑技术。


目前91短视频版在线观看视频可提供3种遗传背景的91短视频在线观 ES细胞:C57BL/6,129/S6,B6;129。

可用于获得以下类型91短视频在线观 模型:

  • 基因敲除

  • 条件性基因敲除

  • KO first

  • 基因敲入

  • 点突变

  • 条件性点突变

  • 定点基因过表达

  • 人源化


91短视频版在线观看视频会对每个项目进行分析与评估,综合时间与风险因素从而选用最合适的技术(ES细胞打靶或CRISPR基因编辑)。


联系我们,与91短视频版在线观看视频的技术顾问讨论如何应用ES细胞打靶技术获得您的动物模型吧!


利用ES细胞打靶技术获得91短视频在线观 模型的一般流程

  1. 设计并构建同源重组载体

  2. 将同源重组载体转入91短视频在线观 ES细胞中

  3. 筛选并验证中靶的阳性ES细胞克隆

  4. 将阳性ES细胞注射到91短视频在线观 囊胚腔中

  5. 将注射后的91短视频在线观 囊胚移植到假孕母鼠子宫内

  6. 获得并筛选验证阳性嵌合体91短视频在线观 F0

  7. 阳性F0通过与野生型91短视频在线观 或FLP91短视频在线观 交配获得F1代杂合子91短视频在线观




CRISPR基因编辑

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CRISPR / Cas9核酸酶系统需要两个组分:用于切割靶序列的Cas酶和与20个碱基对(bp)的靶序列结合指导RNA(sgRNA)。利用靶点特异性的sgRNA 指导 Cas9 核酸酶在基因组上的特定靶点进行DNA双链剪切。通过非同源末端连接(NHEJ)可导致移码突变,实现基因敲除(KO) ;通过同源重组修复(HR)可将外源片段整合到基因组指定位点(KI)。


CRISPR基因编辑技术的优势

  • 与传统的基因打靶方法相比,大大缩短了研发周期。

  • 打破对91短视频在线观 遗传品系的限制,实现不同遗传背景或在已有基因修饰91短视频在线观 模型基础上的基因编辑。

  • 降低基因敲除、敲入91短视频在线观 模型的定制成本。


91短视频版在线观看视频使用最新的CRISPR / Cas9基因编辑技术为您定制属于您的基因工程91短视频在线观 模型。

我们会对每个项目进行分析与评估,综合时间与风险因素从而选用最合适的技术(CRISPR基因编辑或ES细胞打靶)。


联系我们,与91短视频版在线观看视频的技术顾问讨论如何应用CRISPR技术获得您的动物模型吧!


利用CRISPR基因编辑技术获得91短视频在线观 模型的一般流程

  1. 选择靶位点并设计sgRNA,设计同源重组载体(可选)

  2. 制备sgRNA和Cas9 mRNA,构建同源重组载体(可选)

  3. 将sgRNA和Cas9mRNA(以及同源重组载体(可选))注入91短视频在线观 受精卵中

  4. 注射后的受精卵移植到假孕母鼠输卵管

  5. 获得并筛选验证阳性F0代91短视频在线观

  6. 阳性F0通过与野生型91短视频在线观 交配获得F1代杂合子91短视频在线观



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转基因技术

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通过原核显微注射,将设计好的基因(或多基因)注射并随机整合到91短视频在线观 基因组中,获得随机插入的转基因91短视频在线观 。也可以利用高效转座子piggyBac系统,更高效地获得转基因91短视频在线观 模型。


联系我们,与91短视频版在线观看视频的技术顾问讨论如何获得您的转基因动物模型吧!


获得随机转基因91短视频在线观 模型的一般流程

  1. 设计并构建转基因质粒

  2. 将线性化的转基因质粒片段注射到91短视频在线观 受精卵中

  3. 注射后的受精卵移植到假孕母鼠输卵管

  4. 获得并筛选验证阳性F0代91短视频在线观


利用高效转座子系统获得转基因91短视频在线观 模型的一般流程

  1. 设计并构建piggyBac转座子质粒

  2. 将转座子质粒与piggyBac转座酶共同注射到91短视频在线观 受精卵中

  3. 注射后的受精卵移植到假孕母鼠输卵管

  4. 获得并筛选验证阳性F0代91短视频在线观



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